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ELISA的概念、原理、操作步驟ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領域。（一）原理ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，...

表觀遺傳改變可以定義為基因的遺傳性或獲得性改變，但是這種改變和DNA序列改變無關。DNA甲基化是zui為常見的表觀遺傳改變；啟動子或*外顯子CpG島中的甲基化改變將導致基因表達失活；組蛋白的化學修飾也可以作為表觀遺傳改變；組蛋白發(fā)生乙酰化改變的基因通常被開啟。CpG島的異常甲基化是導致基因沉默和過度表達的zui主要的改變，常規(guī)的方法不能在全基因組水平上對甲基化進行檢查。表觀遺傳分析與基因芯片技術結合起來則可以高通量進行甲基化的定性、定量分析。目前建立了2種基于芯片的甲基化分析...

DNA的不同提取方法及比較傳統(tǒng)的DNA提取方法傳統(tǒng)的DNA提取與純化,如CTAB法、SDS法是在裂解細胞的基礎上,多次苯酚氯仿等有機溶劑抽提使蛋白質變性沉淀于有機相,而核酸保留在水相,達到分離核酸的目的;加入RNA酶除去核酸中的RNA;然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70%乙醇漂洗沉淀,除去分離過程中殘留的有機溶劑和鹽離子,以免影響核酸溶解和抑制后續(xù)步驟的酶促反應,zui后用TE溶解DNA備用。CTAB是一種陽離子去污劑,能與核酸形成復合物,此復合物在高鹽（0.7mol/...

體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預防可從以下幾方面著手：1、從物品、用品消毒滅菌著手細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應選擇zui后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：75%的酒精搽拭培養(yǎng)...

固相萃取柱用于HPLC，GC，LC-MS/MS，GC-MS或其他技術分析樣品的制備。廣泛應用在藥物代謝及動力學、藥物分析、生物檢測、毒品和興奮劑檢測、食品安全分析、環(huán)境分析等領域。固相萃取柱應用的科學原理很簡單：一是讓待檢測的化合物通過固相萃取柱，而讓雜質保留在固相萃取柱上，應用廣泛的實例包括C18，PSA，NH2固相萃取柱于農殘分析；另一種策略就是讓雜質穿過固相萃取柱，固相萃取柱有選擇性地濃縮和保留待檢測的化合物。固相萃取就是一種“開、關”原理，待檢測化合物要么*保留再洗脫...

熒光定量PCR因操作方便、運行速度快、實驗結果準確，受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的今天，也許對你來說，zui難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預算，更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳資料。面對各種不同性能的產品，您又該如何選擇呢？認識熒光定量PCR的兩個誤區(qū)：誤區(qū)一：儀器通道越多越好隨著PCR技術的成熟運用，多重擴增越來越熱鬧，熒光定量PCR儀也不能幸免。從zu...