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          ELISA試劑盒實驗操作中可能影響結果的原因及解決辦法

          2017-12-04 [2047]

          ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在廣泛的運用,但操作中的各個環節對試驗的檢測作用影響較大,如不留意,有可能導致顯色不全、花板等成果。遠將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下。

          ELISA試劑盒試驗操作中可能影響成果的原因及解決辦法剖析:
          1 挑選試劑
          挑選質量的檢測試劑,嚴格依照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
          2 加樣可能原因:
          1)血清或血漿標本分離欠好即進行加樣;
          2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時刻過長(特別是室內溫度較高時);
          3)加完標本再加酶試劑時酶濺起孔外。

          ELISA試劑盒解決辦法:
          1) 標本為血清:將血液先天然寄存1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:有必要運用含抗凝劑的血液標本搜集管,采血后有必要當即倒置采血管混合5-10次,放置一段時刻后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要儲存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
          2) 加樣后及時放入孵箱。
          3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板外表輕拭吸干。
          4) 如果選用AT或其他全自動加樣,挑選FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
          5) 標本較多時,請分批操作。
          3、孵育可能原因:
          1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸騰,吸附于孔壁,難于清洗*;
          2) 孵育時刻人為延伸,導致非特異性結合緊附于反響孔周圍,難以清洗*。
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