ELISA實(shí)驗(yàn)吸光值衰減是什么原因?

高教師向吳司理詳細(xì)的說(shuō)明晰試驗(yàn)中呈現(xiàn)的狀況，于是來(lái)電向研域(上海)生物銷售人員吳司理咨詢：加完顯色液(購(gòu)買)顯色必定時(shí)刻后，再加停止液（2M H2SO4，自己制造）后，當(dāng)即測(cè)驗(yàn)其吸光度值，等過(guò)幾分鐘再測(cè)驗(yàn)吸光度值，發(fā)現(xiàn)兩次測(cè)得的吸光度值發(fā)作衰減。第2次均小于次。
吳司理對(duì)試驗(yàn)的問(wèn)題有了必定的了解，隨后組織技術(shù)人員為高教師去，為其解決這一問(wèn)題，高教師恍悟道：本來(lái)ELISA吸光度值衰減這樣處理就可以啦。
其實(shí)詳細(xì)的原因也很簡(jiǎn)單，有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好。一般狀況下，停止反應(yīng)后OD值的下降前期不是很明顯。停止后，吸光度值是會(huì)隨著時(shí)刻衰減，所以一般是加完停止液后當(dāng)即測(cè)，這樣比較準(zhǔn)。西北大學(xué)的高教師在操作ELISA試劑盒試驗(yàn)的時(shí)分發(fā)現(xiàn)了一個(gè)問(wèn)題，
并且，加停止液時(shí)，從*條加到第12條后，測(cè)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，吸光度值從1-12條逐級(jí)衰減。條件是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品，并且包被相同蛋白。
再次剖析12條顯現(xiàn)逐級(jí)遞減的原因看看是否是：

① 顯色時(shí)刻調(diào)整，如果您現(xiàn)在的顯色時(shí)刻是10MIN，那調(diào)整到30MIN，再加停止液,調(diào)查上述現(xiàn)象是否呈現(xiàn)。

② 停止液中參加少數(shù)甘油看下怎么樣。

  ELISA試劑盒顯色時(shí)刻是30分鐘，停止后要求在30分鐘內(nèi)檢測(cè)，參加停止液后，在參加停止液后2到3分終內(nèi)檢測(cè)，這是OD值相對(duì)比較高。擬合值能到達(dá)四個(gè)9。 
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