嚴(yán)格要求ELISA操作定當(dāng)做出好實(shí)驗(yàn)

我們知道，能夠用作ELISA測定的標(biāo)本很廣泛，包含了體液、分泌物和排泄物等，均可作標(biāo)本以測定其間某種抗體或抗原成份。這些標(biāo)本搜集的時(shí)刻、辦法和保存都有必定的要求。今日研域(上海)化學(xué)為您說明：ELISA操作嚴(yán)格要求定當(dāng)做出好試驗(yàn)。
按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備試驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包含用于洗刷的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液運(yùn)用pH計(jì)丈量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后運(yùn)用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
試劑盒的配制：對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀闡明書，留意每批的細(xì)節(jié)。在運(yùn)用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地回收其間的細(xì)胞因子。依據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。一般待測抗原規(guī)范曲線的線性規(guī)模的可通過將規(guī)范品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用規(guī)范的ELISA操作流程、擴(kuò)大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物體系可在必定規(guī)模內(nèi)進(jìn)步靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度，主張孵育規(guī)范品和標(biāo)本。若運(yùn)用過氧化物酶作為顯色體系，應(yīng)禁止在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
試劑盒的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。
洗板辦法：
    ① 手藝洗板，吸去(不行觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在試驗(yàn)臺(tái)上襯托幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾回；將引薦的洗刷緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，依據(jù)需要，重復(fù)此進(jìn)程數(shù)次。
    ② 主動(dòng)洗板，如果有主動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在嫻熟運(yùn)用后再用到正式試驗(yàn)進(jìn)程中。