改良Lowry法蛋白定量試劑盒

改良Lowry法蛋白定量試劑盒

許多年來Lowry法是zui常用也是被引用次數zui多的蛋白質定量方法。其原理是在堿性條件和福林酚Folin-Ciocalteu Reagent存在下，銅離子與蛋白質形成可溶性蘭色復合物，在750 nm有zui大光吸收值。Lowry法的優點是靈敏度高，對脂質、SDS等干擾物質不甚敏感。經典Lowry法的主要缺點是，每次蛋白定量之前必須用兩種不同的試劑A和B （Reagent A and B）新鮮配制堿性銅試劑（Reagent C）。堿性銅試劑（Reagent C）不穩定因而必須每天新鮮配制；另外，經典Lowry法產生的蛋白顏色復合物穩定性較差，在反應20-120分鐘內變化9.2%；蛋白濃度低于15μg/ml時標準曲線的重復性較差；本試劑盒采用改良的Lowry法，用單一添加有穩定劑的堿性銅試劑代替經典Lowry法的試劑A、試劑B、和試劑C。這種改良堿性銅試劑在室溫下穩定12個月以上；測定反應產生的銅蛋白-藍色復合物相當穩定，在2小時內的變化不超過0.3%；反應曲線幾乎100%與原有方案吻合，重復性佳。因而改良Lowry法蛋白定量試劑盒與BCA法蛋白質定量試劑盒一樣，具有非常好的試劑穩定性、檢測靈敏度、和重復性，并且測定過程變得十分簡捷，是經典Lowry法忠實用戶的理想選擇。