ELISA試劑盒分類操作過程

1. ELISA試劑盒白介素類可于白色布景上，直接用肉眼查詢效果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
2. 加酶標抗體：于各反應孔中，參與新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗刷。
3. 加底物液顯色：于各反應孔中參與臨時制作的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
4. 停止反應：于各反應孔中參與2M硫酸0.05ml。
5. 效果判定：可于白色布景上，直接用肉眼查詢效果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：ELISA試劑盒白介素類檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。1.ELISA試劑盒白介素類用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過液。次日洗刷3次。
6. 加一定稀釋的待檢樣品（不知道抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗刷。（一同做空白、陰性及陽性孔對照）
7. 于反應孔中，參與新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗刷,zui后一遍用DDW洗刷。
8. 于各反應孔中參與臨時制作的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘
9. 于各反應孔中參與2M硫酸0.05ml