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          樣品的搜集和保存,了解它有益無害

          2019-06-21 [1612]

          近日,有客戶就樣品的搜集以及保存的問題來電,期望我司能給出主張,正確的搜集和保存也是保證實驗成功的重要根底。
          操作過程:
          1)運用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生很多的泡沫,以免加樣時參加很多的氣泡,產生加樣上的誤差。
          2)依據待測樣品數量加上規范品的數量決議所需的板條數。每個規范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自己的數量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
          3)參加稀釋好后的規范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
          4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
          5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
          6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
          7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
          8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定結果。
          9)在450nm波利益測定各孔的OD值。

          樣品的搜集和保存
          1)血清-----操作過程中防止任何細胞刺激。運用不含熱原和內毒素的試管。搜集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞敏捷小心地分離。
          2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
          3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
          4)組織勻漿-----將組織參加適量shengli鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
          5)保存------假如樣品不當即運用,應將其分成小部分-70 ℃保存,防止重復冷凍。盡可能的不要運用溶血或高血脂血。假如血清中很多顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍結。進口elisa試劑盒應在室溫下凍結并確保樣品均勻地充分凍結。
           

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