今日揭秘ELISA技巧重點檢測有哪些

又是新的一天，11月過的可真快，仿佛剛剛開始，又到了一半了。實驗不光要注意一些事項還要學會掌握技巧，而實驗是要靠不斷的實行來積累經驗的，ELISA試劑盒操作次數多了自然也就熟練了，而對于ELISA新手來說，在實驗之前掌握技巧可有事半功倍效果。下面就來看看研域（上海）生物今天為您推薦的文章內容：新日揭秘ELISA檢測技巧有哪些。       
 
如何防止常見ELISA試劑盒樣品蒸發(fā)？
試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標 板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

研域（上海）化學技術部人員是這樣配制試劑的：
Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請配置標準品及工作液，ELISA試劑盒盡量不要微量配置（如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl），以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

加樣步驟的經驗總結：
加樣或加試劑時，請注意在吸取標本/標準品，酶結合物或底物時，*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育”時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間（包括標準品及所有樣品）控制 在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。

 在ELISA檢測技巧中，研域（上海）生物建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數。
在ELISA測定中試劑的準備zui為關鍵的是，ELISA試劑盒在實驗開始前，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20min以上后，再進行測定，以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應步驟中，能使反應微孔內的溫度較快地達到所要求的高度，以滿足測定要求。