細胞五分類技能及其運用發展

細胞分析儀是醫院臨床查驗運用十分廣泛的儀器之一，是指對必定體積內血細胞數量及異質性進行分析的儀器。20世紀9o年代以來，跟著電子技能、流式細胞技能、激光技能、電子計算機技能和新熒光化學物質等各種高新技能在血細胞分析儀中的運用.使血細胞分析儀的檢測原理不斷完善、測量參數不斷增加、檢測水平不斷提高.尤其在白細胞五分類技能方面，已發展到使用多項技能（如射頻、細胞化學染色、流式細胞術和熒光染色技能等）聯合一起檢測一個白細胞.再用先進的計算機技能區別、辨別經上述辦法處理后的各自細胞間的細胞不同.綜合分析實驗數據，得出較為精確的白細胞分類成果。為臨床疾病的診斷、治療供給了重要的實驗室根據。近年來。能夠對白細胞進行五分類計數的血細胞分析儀現已普遍運用。本文就現在血細胞五分類測定中常用技能及其運用發展作一綜述。

1 細胞五分類技能的原理
1. 流式細胞術
 流式細胞術（flow cytometry，FCM）是一種綜合運用光學、機械學、流體力學、電子計算機、細胞生物學、分子免疫學等學科技能，使被測溶液流經測量區域，并逐個檢測其間每一個細胞的物理和化學特性，從而對高速活動的細胞或亞細胞進行快速定量測定和分析的辦法。
首先，待測細胞經處理或染色后被壓人活動室，與此一起，不含細胞的緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管人口方向與待測樣品流成必定視點，這樣鞘液就能被包繞著樣品高速活動，組成一個圓形的流束，待測細胞在包繞下單行擺放，順次經過檢測區域.在激光束的照射下發生散射光和激起熒光。這兩個光源信號分別反映了細胞體積的巨細和內部的信息.經光電倍增管接納后可轉換為電信號，再經過模，數轉換器.將接連的電信號轉換為可被計算機識別的數字信號，經計算機處理，可將分析成果顯示在屏幕上。
為了確保細胞單個擺放地逐個經過檢測區域，鞘流技能在流式細胞術中被廣泛運用。根據層流理論，因為兩種液體的流速和壓力不同。在必定條件下樣品溶液與包裹它的鞘液在活動中能夠保持彼此分離并且同軸。一起鞘液流能夠加快樣品溶液中顆粒的活動并迫使他們的活動軌道保持在液流的中軸線上，使細胞單擺放地逐個經過檢測區域，這便是所謂的液流聚集原理

2.阻抗法
根據庫爾特原理，將不良導體血液按必定份額稀釋于等滲的電解液中，在小孔電極的兩側加一恒流源.在負壓效果下，使稀釋的血細胞經過小孔。當細胞經過截面時會因為電阻增大發生相應的脈沖，其脈沖的幅度與細胞的體積成正比，脈沖的頻度與細胞的數量成正比。這便是的庫爾特原理或稱變阻脈沖原理。使用庫爾特原理能夠有效地區別淋巴及單核細胞。

3. 激光散射法／多視點偏振光散射技能
根據光散射理論，當激光照射到活動室內流過的每一個細胞時，因為細胞的物理特性，部分光線從細胞上經不同的視點散射。其間，前向小視點散射光的光強能夠反響細胞體積；大視點散射光的光強能夠反響細胞核，漿復雜度和細胞顆粒的信息；而側向散射光的光強能夠反響細胞膜、核膜、細胞質的變化。因而，能夠根據細胞表明光散射的特色對細胞進行分類。用激光光源發生的單色光束直接進入計數池的敏感區，在不同視點（10度～7O度）對每個細胞進行掃描分析，測定其散射光強度，從而供給細胞結構、形態的光散射信息。因為粗顆粒細胞的散射強度比細顆粒細胞更強，故光散射對細胞顆粒的構型和顆粒質量具有很好的區別能力。