首頁 > 技術(shù)文章 > 收到常溫細(xì)胞應(yīng)該如何處理呢?

          收到常溫細(xì)胞應(yīng)該如何處理呢?

          2020-12-21 [3514]

          收到常溫細(xì)胞應(yīng)該如何處理呢?

          1. 首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。

          2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量叢瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)趨置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

          4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài);建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

          5. 貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5m左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。

          6. 懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離 心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5m培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密,度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。

          溫馨提醒:
          可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管中備用;細(xì)胞*傳代時,可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客自備的培養(yǎng)基混合使用,讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后,應(yīng)及時將部分細(xì)胞凍存,再進(jìn)行后續(xù)的實驗,避免后期實驗失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失,影響后續(xù)實驗。

          主站蜘蛛池模板: 欧美成人精品福利网站| 亚洲国产成人99精品激情在线| 成人污视频在线观看| 九九精品免视看国产成人| 免费一级成人毛片| 四虎影视成人永久在线播放| 国产成人av三级在线观看| 免费成人在线观看| 99久久国产综合精品成人影院| 欧美成人xxx| 成人18在线观看| 免费无码成人av在线播放不卡| 91精品成人福利在线播放| 成人男女网18免费视频| 亚洲国产成人99精品激情在线| 欧美人成人亚洲专区中文字幕| 国产成人精品999在线| 青青草成人影院| 国产成人无码综合亚洲日韩| 久久成人国产精品免费软件| 女性成人毛片a级| 亚洲av成人一区二区三区| 国产成人精品综合在线观看| 欧美成人家庭影院| www亚洲欲色成人久久精品| 国产成人教育视频在线观看| 成人午夜高潮A∨猛片| 久久久久亚洲av成人无码| 国产精品成人va在线观看| 成人漫画免费动漫y| 欧美成人免费全部观看在线看| 亚洲精品亚洲人成人网| 国产成人无码精品一区不卡| 色偷偷成人网免费视频男人的天堂 | 日韩欧美成人免费中文字幕| 国产成人一区二区三区视频免费| 成人免费毛片视频| 成人做受视频试看60秒| 成人妇女免费播放久久久| 成人美女黄网站视频大全| 成人午夜电影在线|