ELISA試劑盒實驗有哪些步驟

上海研域生物ELISA試劑盒是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。雖然ELISA試劑盒的操作步驟看似簡單易操作，但如果我們在實驗的時候細節沒做到位的話就會直接影響實驗的效果。所以我們要注重ELISA試劑盒實驗時至關重要的步驟有哪些呢？今天帶大家一起來了解下：

、重要的洗滌：

不充分的洗滌會導致差異和高背景，從而帶來不理想的實驗結果。如果未結合的材料殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。有必要的話，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結合反應。如果背景過高，懷疑洗滌不夠時，可以嘗試增加洗滌次數。

第二、關鍵的封閉：

封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。如果背景過高，懷疑封閉不充分，那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當延長封閉時間。

目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。使用的類型須取決于多個因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的封閉液應降低非特異性結合，但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發生相互作用。

第三、抗體濃度須優化：

如果試劑稍有不同，則可能需要優化抗體的量。非特異的抗體結合會增加背景。為了防止這一點，切勿使用過多的一抗或二抗。

第四、檢測試劑要適量：

切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導致高背景。也不要顯色過度，如有必要，優化一下何時應加入終止液。

只有確保每一步操作都做到位，才會呈現理想的實驗結果。所以ELISA實驗的每一步都很重要，我們在實驗的時候切記不可以掉以輕心。