細(xì)胞培養(yǎng)常見的問題怎么決絕

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么？丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。

倒置相差顯微鏡

倒置顯微鏡一般構(gòu)造與普通顯微鏡一樣有物鏡目鏡光源光路系統(tǒng)等。但倒置顯微鏡的光源位于在載物臺上放，光線由上至下照射到觀察物上，物鏡則位于載物臺下方，觀察培養(yǎng)細(xì)胞多用放大倍數(shù)為 10×和 20×的物鏡，目鏡為 10×。

擦拭鏡頭可用沾酒精/乙混合液或二甲苯的鏡頭紙或脫脂棉。

擦拭涂漆表面，可用紗布除去灰塵。若有油漬污垢，用紗布沾少許汽油去除，不能用有機(jī)溶劑（如：酒精乙和其它稀釋劑）擦拭涂漆表面和塑料部件。

儀器不使用時(shí)，用有機(jī)玻璃或聚乙烯罩上，并存放于干燥且沒有霉菌滋生的地方。

物鏡和目鏡放在有干燥劑的密閉容器中。

需要注意：

1、-80度凍存細(xì)胞的時(shí)間太長，一般如果需要長期保存的話，超過一個(gè)月。轉(zhuǎn)入液氮。原有的凍存細(xì)胞狀態(tài)就不好，表現(xiàn)為細(xì)胞活力不夠，細(xì)胞密度不高。

換液太快，培養(yǎng)體系太大，如果細(xì)胞狀態(tài)不好，保持較小的培養(yǎng)容積，以獲得較高的細(xì)胞密度。如果培養(yǎng)基還是桃紅色，說明細(xì)胞的代謝活動(dòng)很弱，此時(shí)不宜換液。不知道你這個(gè)細(xì)胞是喜歡聚集生長還是離散生長。

根據(jù)條件調(diào)節(jié)。比如，如果喜歡聚堆長，建議先傾斜培養(yǎng)瓶/皿，2h為一個(gè)時(shí)間間隔，觀察細(xì)胞狀態(tài)，以作調(diào)整。

2、如果當(dāng)天能見到貼壁的話,說明還是可以的.有時(shí)候培養(yǎng)基顏色偏紫,細(xì)胞貼壁會(huì)有問題的.你核實(shí)一下你培養(yǎng)基顏色是否偏堿.如果偏堿,可以適當(dāng)調(diào)高培養(yǎng)箱二氧化碳的濃度.或者換新的培養(yǎng)基.特別是開啟過的培養(yǎng)基,適用時(shí)間長容易出現(xiàn)這個(gè)問題。

3、細(xì)胞凍存過程如果出了問題，復(fù)蘇細(xì)胞溶解要迅速，有時(shí)候水浴鍋刀38度，甚至40度，目的是讓其快速解凍，而且復(fù)蘇一次的培液血清濃度可以相對高一點(diǎn)，等第二次換液時(shí)換回10%。