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          大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶檢測試劑盒操作注意事項

          2022-08-16 [1366]

          大鼠 (Rat) 溴脫氧核苷尿嘧啶 (BrdU) ELISA 檢測試劑盒操作注意事項

          本試劑僅供研究使用     

          試驗原理:

          BrdU試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BrdU濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BrdU和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BrdU的濃度呈比例關系。


          大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶檢測試劑盒操作注意事項

          1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

          2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

          3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

          4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

          5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

          6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

          7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

          8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

          按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作


          局限

          6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到精確的結(jié)果。


          試劑盒性能

          1. 靈敏度:小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

          2. 特異性:不與其它細胞因子反應。

          3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。


          結(jié)果判斷與分析

          1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

          2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BrdU標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BrdU含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。


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