關(guān)于人白介素ELISA試劑盒的使用方法

人白介素ELISA試劑盒靈敏、高校、均勻、吸附性好、回收率高。是一種購(gòu)買按全的ELISA試劑盒產(chǎn)品。用雙抗體夾心法測(cè)定人白細(xì)胞介素水平。純化后的人白細(xì)胞介素抗體用微孔板包被制成固體抗體。然后將抗體加入包被的單克隆抗體的微孔中，與HRP標(biāo)記的IL抗體結(jié)合形成抗體-抗原-酶-抗體復(fù)合物。清洗后，加入基質(zhì)TMB顯色。

人白介素ELISA試劑盒的使用方法是什么呢？

1、試劑準(zhǔn)備：所有試劑都須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

2、加樣：加樣或試劑時(shí)，請(qǐng)注意，取樣/標(biāo)準(zhǔn)品、酶復(fù)合物或底物時(shí)，前孔與后孔加樣的時(shí)間間隔過(guò)大，會(huì)導(dǎo)致“孵育"時(shí)間不同，這將顯著影響測(cè)量值的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。一次加樣時(shí)間（包括標(biāo)準(zhǔn)品和所有樣品）控制在10分鐘以內(nèi)。如果樣品較多，建議用多通道移液管加樣。

3、孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)應(yīng)將反應(yīng)板放在一個(gè)用濕布覆蓋的封閉箱內(nèi)，并對(duì)酶板進(jìn)行覆蓋或涂膜，以防液體蒸發(fā)；清洗后應(yīng)盡快進(jìn)行下一步操作，酶板應(yīng)隨時(shí)保持干燥同時(shí)，嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。

4、洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。

5、試劑配制：使用前，檢測(cè)A和檢測(cè)B應(yīng)離心幾次或幾次以下，然后再使用，使液體沉積在管壁或瓶蓋上，直至管底。標(biāo)準(zhǔn)品、供試品溶液的工作液a和工作液B應(yīng)按要求量使用，并用相應(yīng)的稀釋劑配制，不能混淆。請(qǐng)務(wù)必配置好標(biāo)準(zhǔn)液和工作液，盡量不要微量配置（如果檢測(cè)液a被吸收，一次不得少于10μl），以免稀釋不準(zhǔn)確造成濃度誤差；不要重復(fù)使用稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)液、工作液a或工作液B。

6、反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。

7、底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。

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