正常人外周血白細胞的分離-自然沉降法

正常人外周血白細胞的分離-自然沉降法
正常人外周血紅細胞與白細胞的比例約為6000～1000:1，兩類細胞的沉降速度不同，進行正常人外周血白細胞分離。

1 、試劑及配制
1）無Ca2+ 、Mg2+ Hank’s液。
2）含10%～20% 滅活小牛血清Hank’s液。

2 、操作方法
1）取靜脈血2ml，放入加有抗凝劑的試管中，輕輕混勻。
2）將試管直立靜置于室溫或37℃溫箱中30～60min，待紅細胞自然沉降。此時可見試管中的懸液分3層，上層為淡血漿，底層為紅細胞，在緊貼紅細胞層上有一呈灰白色的白細胞層（正常人外周血白細胞）。
3） 用毛細管吸取位于紅細胞層上面的富含白細胞的細胞懸液，移入另一試管中；
4） 加入無Ca2+ 、Mg2+ Hank’s液至離試管口3cm處，混勻，以水平離心機2000r/min 離心10min，棄上清，同法在洗滌兩次。
5）沉淀細胞用適量10%～20% 滅活小牛血清的Hank’s液重懸，計數，配成所需的細胞濃度的懸液，一般常用2×106 /min。

正常人外周血白細胞的分離-自然沉降法