首頁 > 技術(shù)文章 > 96T兔皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒云南,麗江

          96T兔皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒云南,麗江

          2012-05-18 [1830]

          兔皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒云南,麗江

          本試劑僅供研究使用  標(biāo)本:血清或血漿

          兔皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒云南,麗江

          試驗(yàn)原理:
          Cortisol試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知Cortisol濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將Cortisol和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Cortisol的濃度呈比例關(guān)系。

          兔皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒云南,麗江

          試劑盒內(nèi)容及其配制
          試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
          96/48人份酶標(biāo)板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
          塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
          標(biāo)準(zhǔn)品:800ng/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進(jìn)行稀稀
          空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
          標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
          生物素標(biāo)記的抗Cortisol抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
          親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
          洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進(jìn)行稀釋
          底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
          底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
          終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型

          自備材料
          1. 蒸餾水。
          2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
          3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

          安全性
          1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
          2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          操作注意事項(xiàng)
          1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
          2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
          3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
          4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
          5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
          6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
          7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
          8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
          9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

          樣品收集、處理及保存方法
          1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
          2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
          3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
          4、 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

          試劑的準(zhǔn)備
          1. 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
          800 ng/ml (6號標(biāo)準(zhǔn)品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
          400 ng/ml (5號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          200 ng/ml (4號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          100 ng/ml (3號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          50 ng/ml (2號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          25 ng/ml (1號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          0 ng/ml (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

          2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

          操作步驟
          1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
          2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
          3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
          4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
          5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
          6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
          7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
          8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
          9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。

          建議使用的實(shí)驗(yàn)方案
           標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml) 
          A 800 800 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          B 400 400 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          C 200 200 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          D 100 100 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          E 50 50 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          F 25 25 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品


          局限
          6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

          試劑盒性能
          1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
          2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
          3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

          結(jié) 果 判 斷 與 分 析
          1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

          2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的Cortisol標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的Cortisol含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

          3、檢測值范圍:0-800ng/ml

          4、敏感度: 1.0 ng/ml
          DB0378-100g Diantipyrylmethane 二安替比林甲烷 [1251-85-0]
          DLS004327-1KU Diaphorase 心肌黃酶 [9001-18-7]
          DLS004330-2KU Diaphorase 心肌黃酶 [9001-18-7]
          DT1568-50g Diatomaceous earth 硅藻土 [68855-54-9]
          D6430-100g 1,8-Diazabicyclo 二氮雜二環(huán) [6674-22-2]
          DB0379-25g Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate D(+)-二苯甲酰酒石酸一水 [80822-15-7]
          DB0379-100g Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate D(+)-二苯甲酰酒石酸一水 [80822-15-7]
          DB0380-25g Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate L(-)-二苯甲酰酒石酸一水 [62708-56-9]
          DB0380-100g Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate L(-)-二苯甲酰酒石酸一水 [62708-56-9]
          D6086-25g N,N′-Dibenzylethylenediamine N,N-二芐基乙二胺DBE [140-28-3]
          D6420-25g 9,10-Dibromoanthracene 9,10-二溴蒽 [523-27-3]
          D6427-25g 2,5-Dibromobenzoic acid 2,5-二溴苯甲酸 [610-71-9]
          D6075-500g trans-2,3-Dibromo-2-butene-1,4-diol 2,3-二溴丁烯-1,4-二醇 [3234-02-4]
          D6035-100g 3,5-Dibromo-4-hydroxybenzaldehyde 二溴醛 [2973-77-5]
          D6442-25g 2,6-Dibromophenol 2,6-二溴苯酚 [608-33-3]
          D6074-100g 2,3-Dibromosuccinic acid 2,3-二溴丁二酸 [526-78-3]
          D2215-250g Dibutyl maleate 順丁烯二酸二丁酯 [105-76-0]
          D1376-250g 2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol 2,6-二叔丁基對甲酚 [128-37-0]
           

          主站蜘蛛池模板: 国产欧美日韩成人| 成人嗯啊视频在线观看| 四虎精品成人免费永久| 成人深夜福利视频| 国产成人理在线观看视频| 亚洲国产成人精品女人久久久 | 亚洲国产成人精品无码区花野真一 | 亚洲成人在线网| 成人午夜兔费观看网站| 成人怡红院视频在线观看| 国内自拍成人网在线视频| 亚洲欧美成人综合久久久| 成人黄色在线网站| 亚洲成人xxx| 四虎成人精品国产永久免费无码 | 日韩成人在线免费视频| 国产亚洲综合成人91精品| 成人综合久久综合| 精品无码成人片一区二区98| 国产成人精品综合在线观看| 久久久久99精品成人片| 国产成人精品一区二区三区无码| 亚洲AV一二三区成人影片| 成人免费在线观看网站| 成人福利视频app| 最新69堂国产成人精品视频| 欧美日韩亚洲成人| 黑人粗长大战亚洲女2021国产精品成人免费视频 | 成人免费观看高清在线毛片| 国产成人精品cao在线| 国产成人无码精品久久久露脸| 成人男女网18免费视频| 成人综合婷婷国产精品久久蜜臀| 欧美成人手机在线视频| 成人毛片免费视频| 在线观看成人网站| 成人免费无码大片a毛片软件| 国产成人综合久久精品亚洲| 亚洲一成人毛片| 国产成人综合久久精品下载| WWW夜片内射视频日韩精品成人|