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          48T人髓鞘堿性蛋白抗體ELISA 檢測試劑盒

          2012-08-06 [1169]

          人髓鞘堿性蛋白抗體ELISA 檢測試劑盒            

          本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

          試驗原理:
              MBP-Ab試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知MBP-Ab濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將MBP-Ab和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中MBP-Ab的濃度呈比例關系。

          自備材料
          蒸餾水。
          加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
          振蕩器及磁力攪拌器等。

          安全性
          避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
          實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
          不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          人髓鞘堿性蛋白抗體ELISA 檢測試劑盒 

          操作注意事項
          試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
          實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
          不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
          使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
          使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
          洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
          底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
          加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
          按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

          樣品收集、處理及保存方法
          血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
          血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
          細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
          組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
          保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

          洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

          人髓鞘堿性蛋白抗體ELISA 檢測試劑盒 

          操作步驟
          使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
          根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
          加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
          甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
          每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
          甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
          每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
          取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
          在450nm波長處測定各孔的OD值。

          6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

          試劑盒性能
          1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
          2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
          3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

          人髓鞘堿性蛋白抗體ELISA 檢測試劑盒 

          結 果 判 斷 與 分 析
          1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

          2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的MBP-Ab標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的MBP-Ab含量可根據其OD值由標準曲線換算出濃度。

          3、檢測值范圍:0-80IU/L

          4、敏感度: 0.1 IU/L

          Copper(II) sulfate, anhydrous 無水酸銅 [7758-98-7] 250g
          Copper(II) tartrate, trihydrate 酒石酸銅三水 [815-82-7] 250g
          Cortisone 21-acetate 醋酸可的松 [50-04-4] 25g
          Coumarin 香豆素 [91-64-5] 100g
          Creatine, monohydrate 肌酸一水 [6020-87-7] 100g
          CTAB 十六烷基-*基-溴化銨 [57-09-0] 100g
          CTAB 十六烷基-*基-溴化銨 [57-09-0] 500g
          CTAC 十六烷基-*基-氯化銨 [112-02-7] 100g
          CTAC 十六烷基-*基-氯化銨 [112-02-7] 500g
          Creatine, monohydrate 肌酸一水 [6020-87-7] 500g
          Creatine phosphate 磷酸肌酸鈉鹽四水 [922-32-7] 5g
          Creatine phosphate 磷酸肌酸鈉鹽四水 [922-32-7] 25g
          o-Cresolphthalein complexon 鄰甲酚酞絡合指示劑 [2411-89-4] 25g
          o-Cresolphthalein complexon sodium salt 鄰甲酚酞絡合鈉鹽 [94442-10-1] 10g
          m-Cresol purple 間甲酚紫; 2-甲酚酞; 3,3ˊ-二甲基酚酞 [2303-01-7] 25g
          D-Cycloserine D-環絲氨酸 [68-41-7] 10g
          Cyromazin 環丙氨嗪 [66215-27-8] 100g
          Cytosine 胞嘧啶 [71-30-7] 10g
          o-Cresolsulfonphthalein 甲酚紅 [1733-12-6] 5g
          o-Cresolsulfonphthalein 甲酚紅 [1733-12-6] 25g
          Cresol red, sodium salt 甲酚紅鈉鹽; 鄰甲酚紅鈉 [62625-29-0] 5g
          Cresol red, sodium salt 甲酚紅鈉鹽; 鄰甲酚紅鈉 [62625-29-0] 25g
          Cresol red, sodium salt 甲酚紅鈉鹽; 鄰甲酚紅鈉 [62625-29-0] 1g
          Cresol red, sodium salt 甲酚紅鈉鹽; 鄰甲酚紅鈉 [62625-29-0] 5g
          Cromolyn, sodium salt 色苷酸鈉 [15826-37-6] 5g
          Crystal violet 結晶紫 [548-62-9] 25g
          Crystal violet 結晶紫 [548-62-9] 100g
          Crystal violet 結晶紫 [548-62-9] 100g
          Crystal violet hydrate solution 結晶紫溶液 / 50ml
          Curcumin 姜黃素 [458-37-7] 5g
          Cy* 單氰胺 [420-04-2] 250g
          Cyanoacetic acid 氰乙酸; 氰基醋酸 [372-09-8] 250g
          4-Cyanophenylhydrazine hydrochloride 4-氰基苯肼鹽酸鹽 [2863-98-1] 25g
          Cyclocytidine 環胞甙鹽酸鹽 [10212-25-6] 5g
          a-Cyclodextrin, hydrate a-環 糊 精 [10016-20-3] 5g
          a-Cyclodextrin, hydrate a-環 糊 精 [10016-20-3] 25g

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