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          免費代測人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA檢測試劑盒

          2012-09-11 [1306]

          人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA檢測試劑盒            

          本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

          試驗原理:
              GP-BB試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知GP-BB濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將GP-BB和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中GP-BB的濃度呈比例關系。
            
          安全性
          避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
          實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
          不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA檢測試劑盒 

          操作注意事項
          試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
          實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
          不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
          使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
          使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
          洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
          底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
          加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
          按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

          樣品收集、處理及保存方法
          血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
          血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
          細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
          保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

          人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA檢測試劑盒 

          操作步驟
          使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
          根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
          加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
          甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
          每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
          甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
          每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
          取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
          在450nm波長處測定各孔的OD值。

          試劑盒性能
          1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
          2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
          3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

          人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA檢測試劑盒 

          結 果 判 斷 與 分 析
          1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

          2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的GP-BB標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的GP-BB含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

          3、檢測值范圍:0-800pg/ml

          4、敏感度: 1.0 pg/ml

          HRG-alpha (Heregulin-alpha) 抗HRGα抗體 0.2ml
          HSA(Human sermu albumin) 兔抗人血清白蛋白抗體 0.2ml
          Avidin /Gold Avidin—膠體金5nm 0.5ml
          NRG1/HRG-β(Heregulin-β) 抗HRGβ抗體 0.2ml
          HSTF2/HSF2(Heat Shock Transcription Factor 2) 熱休克轉錄因子2抗體 0.2ml
          HSL/LIPE(hormone-sensitive lipase) 荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml
          HSL/LIPE(hormone-sensitive lipase) 荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.2ml
          Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗體 0.2ml
          HSP-20(Heat Shock Protein 20) 熱休克蛋白-20抗體 0.1ml
          Goat anti-Rabbit IgG/RBITC 羅丹明標記羊抗兔IgG 0.3ml
          Goat anti-mouse IgG/RBITC 羅丹明標記羊抗小鼠IgG 0.3ml
          HSP-20(Heat Shock Protein 20) 熱休克蛋白-20抗體 0.2ml
          HSP-27(Heat Shock Protein 27) 熱休克蛋白-27抗體 0.1ml
          HSP-27(Heat Shock Protein 27) 熱休克蛋白-27抗體 0.2ml
          HSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60抗體 0.1ml
          HSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60抗體 0.2ml
          HSP47( Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗體 0.2ml
          Rabbit anti-chicken IgG/Gold 金標記兔抗雞IgG(10nm/15nm) 0.5ml
          Rabbit anti-chicken IgG/Gold 金標記兔抗雞IgG(10nm/15nm) 1ml
          Rabbit anti-chicken IgM/Gold 金標記兔抗雞IgM(10nm/15nm) 2ml
          HSP-70 (Heat shock protein-70) 熱休克蛋白-70抗體 0.1ml
          HSP-70 (Heat shock protein-70) 熱休克蛋白-70抗體 0.2ml
          HSP75/TRAP-1(Heat Shock Protein 75) 熱休克蛋白-75抗體 0.2ml
          HSP-90α(Heat Shock Protein 90α ) 熱休克蛋白90α抗體 0.1ml
          HSP-90α(Heat Shock Protein 90α ) 熱休克蛋白90α抗體 0.2ml
          HSP-90β (heat sock protein-90β) 熱休克蛋白-90β 抗體 0.1ml
          Rabbit anti-dog IgG/Gold 金標記兔抗狗IgG (10nm/15nm) 2ml
          HSP-90β (heat sock protein-90β) 熱休克蛋白-90β 抗體 0.2ml
          HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗體 0.1ml
          HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗體 0.2ml
          HSPG1/Syndecan-2(heparin sulphateprotoglycans 1) 多配體蛋白聚糖2/硫酸肝素糖蛋白1抗體 0.2ml
          HtrA2/Omi(High temperature requirementprotein A 2) 絲氨酸蛋白酶/線粒體絲氨酸蛋白酶抗體 0.2ml
          TRT(omerase catalytic subunit) 端粒酶抗體 0.1ml
          Rabbit FITC/Gold 金標記兔抗熒光素(10nm/15nm) 2ml
          TRT(omerase catalytic subunit) 端粒酶抗體 0.2ml
          Human serum 兔抗人血清抗體 0.2ml
          Hydroxyethyk starch/HES 130/0.4 羥乙基淀粉抗體 0.2ml
          COX10 COX10抗體 0.1ml
          COX10 COX10抗體 0.2ml
          IAA(Indole-3-Acetic Acid) 吲哚-3-乙酸抗體/植物生長素抗體 0.1ml
          IAA(Indole-3-Acetic Acid) 吲哚-3-乙酸抗體/植物生長素抗體 0.2ml
          API5/AAC11(Apoptosis inhibitor 5) 凋亡抑制因子5抗體 0.2ml
          Goat anti-human IgG/RBITC 羅丹明標記羊抗人IgG 0.3ml
          Goat anti-Rat IgG/RBITC 羅丹明標記羊抗大鼠IgG 0.3ml

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