小鼠抗利尿激素（ADH） ELISA 試劑盒使用說明書

小鼠抗利尿激素（ADH） ELISA 試劑盒使用說明書
1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100ul，余孔分別加標準 品或待測樣品100ul，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液100ul（取1ul檢測溶液A加99ul 檢測稀釋液A的
比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。
3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350ul/每孔，甩干。
4.每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液）100ul，37℃，60分鐘。
小鼠抗利尿激素（ADH） ELISA 試劑盒使用說明書
5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350ul/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光顯色（30分鐘以內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有 明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.依序每孔加終止溶液50ul，終止反應（此時藍色立轉）。終止液的加入順序應盡量與底 物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內進行 檢測。
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注：1．每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物液及2NH2SO4。 測量時先用此孔調OD值至零。
2．為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。
3. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B 工作液請依
據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
4. 建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。