化學發(fā)光ELISA試劑盒測尿微量白蛋白

健康人MAU在<20～30mg/24h（或<20～30μg/min）的范圍內(nèi);MAU在20～300μg/24h時稱其為MAU;MAU>300mg/24h時稱其為大量白蛋白尿。目前上十分正視MAU的測定，以為這項指標對早期治療原發(fā)病、分析病程進展、 評價相關(guān)危險因素具有重要意義。為了使這一檢測指標尺度化，上采用白蛋白分泌率表示尿中白蛋白的排出量。本文分別用ELISA法和化學發(fā)光法測定尿微量白蛋白濃度，對其結(jié)果進行比較，并比較其優(yōu)缺點，從而評價ELISA法的臨床合用性。 MAU排出量增加是疾病早期的改變，對疾病的早期診斷，早期治療有重要的參考價值和臨床意義。尿微量白蛋白（MAU）是指尿中白蛋白含量超出健康人參考范圍，但不能用常規(guī)的方法檢測出這種微量的變化。大量的臨床研究表明MAU是猜測糖尿病、高血壓、心血管疾病血管損傷的敏感指標。
1、標本采集及處理　　
    取每位患者的晨尿4～5ml于冰箱4～8℃保存，收集至115份標本之后，1周之內(nèi)同時采用2種方法測定。化學發(fā)光法試劑為：美國DPC公司生產(chǎn)的YZB/USA 2153-40 白蛋白試劑盒；ELISA法：上海伊麗薩生物科技有限公司供應(yīng)的尿微量白蛋白ELISA試劑盒。
2、方法
   化學發(fā)光法：嚴格按照美國DPC公司生產(chǎn)的白蛋白試劑盒操作手冊進行。
   ELISA法：嚴格按照尿微量白蛋白ELISA試劑盒的操作手冊進行。
   測定分析：用上述兩種方法對上述115份患者尿標本微量白蛋白濃度進行測量，分別在ELX—800酶標儀上和全自動化學發(fā)光分析儀上直接讀取結(jié)果。
   統(tǒng)計學檢驗：采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件，檢測數(shù)據(jù)表示用x±s，組間數(shù)據(jù)比較用t檢驗，變量間的變化采用相關(guān)性分析。
3、結(jié)果
   為了評價ELISA法測定尿微量白蛋白的準確性，我們采用雙盲的方法與化學發(fā)光法進行比較。收集115例病人尿樣分別使用ELISA方法和化學發(fā)光法進行測定，化學發(fā)光法測定的平均值為10.39 mg/L，ELISA法測定的平均值為10.56mg/L，統(tǒng)計學線性回歸分析顯示相關(guān)系數(shù)r值為0.994。二者有較好的相關(guān)性，且P＞0.05，即可以認為用ELISA測定的尿微量蛋白結(jié)果與化學發(fā)光測定結(jié)果沒有明顯差異。
4、討論
   近年有資料顯示，微量白蛋白尿也長短糖尿病患者心血管疾病發(fā)病的一個危險因子，受到廣泛正視。微量白蛋白尿的臨床應(yīng)用廣泛，微量白蛋白尿是反映腎臟疾病和損傷的一個非常敏捷的指標，在預兆糖尿病、腎病方面已使用多年。因此，本文主要探討ELISA試劑盒法檢測尿微量白蛋白的優(yōu)缺點。化學發(fā)光法雖具有高敏捷度、高正確度、高精密度、寬線性、反應(yīng)快速，影響因素少，結(jié)果正確等長處，但化學發(fā)光法的缺點是儀器、試劑本錢高，給患者帶來的經(jīng)濟負擔相對較重。而ELISA法設(shè)備簡樸，易于開展，收費低廉，可用臨床普查，還具有簡便易行，不污染環(huán)境等長處。白蛋白是血漿白蛋白，由肝臟產(chǎn)生，分子量為66KD，半徑約為3.6nm，在血漿環(huán)境中帶負電荷，不易通過腎小球基底膜的孔徑屏障和電荷屏障，而原尿中的白蛋白在腎小管幾乎全部被重吸收，所以逐日排出量僅10～30mg，常規(guī)干化學定量測定尿蛋白為陰性，故臨床習慣稱正常尿中無蛋白。通常用常規(guī)方法難以檢出，而當病變發(fā)展到尿常規(guī)蛋白測定結(jié)果為陽性時，腎臟的損傷往往已達到不可恢復的階段。本文檢測結(jié)果與化學發(fā)光法同樣正確，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），相關(guān)性良好（r=0.994），所以 ELISA法測定尿微量白蛋白具有經(jīng)濟、實用的特點，因此ELISA法更合用于臨床，應(yīng)得到普遍推廣。當腎臟發(fā)生早期損害時，因為腎小球毛細管滲透滲出性和血管壁成分的改變，白蛋白可通過腎小球基底膜滲透滲出到尿液中，尿中白蛋白排泄顯著高于正常，其濃度通常在20~200mg/L之間，于是形成了微量白蛋白尿。近年來很多研究表明尿微量白蛋白不僅是糖尿病腎病的猜測指標，也是心血管疾病的獨立危險因素，所以檢測尿微量白蛋白有重要的臨床價值。本文分別用ELISA法和化學發(fā)光法測定尿微量白蛋白濃度，對其結(jié)果進行比較，并比較其優(yōu)缺點，從而評價ELISA法的臨床合用性。目前，已泛起多種檢測尿中微量白蛋白的方法，如化學發(fā)光法、放射免疫法、試條半定量法、免疫比濁法等。