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          雞(Chicken)卵黃蛋白原VTG 試劑盒說明書

          2014-01-15 [1048]

          雞(Chicken)卵黃蛋白原VTG

          本試劑盒僅供研究使用      標本:血清或者血漿

           

          • 試 劑 組 成

          精密度微孔板96孔

          Microtitration Strips

          1

          2~8℃干燥保存

          酶標偶合液

          (Conjugate )  

          1瓶 12.0毫升

          2~8℃冷藏保存

          標準品

          (Standard)

          5瓶 各1.0毫升

          2~8℃冷藏保存

          呈色劑A

          (Substrate A)

          1瓶 6.0毫升

          2~8℃避光冷藏保存

          呈色劑B

          (Substrate B)

          1瓶 6.0毫升

          2~8℃避光冷藏保存

          終止液

          (Stopping Solution)

          1瓶 6.0毫升

          室溫保存

          20倍濃縮洗滌液

          (Rinsing Buffer x 20

          1瓶 60.0毫升

          2~8℃冷藏保存

          5倍濃縮樣品稀釋液

          (Diluent x 5

          1瓶 15.0ml

          2~8℃冷藏保存

          英文說明書,中文說明書

           

          各一份

          室溫保存

           

          二、注意事項

          1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。

          1. 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
          2. 濃縮洗滌液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘。
          3. 濃縮樣品稀釋液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘
          4. 若24小時內進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
          5. 在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。
          6. 加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
          7. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。

           

          三、實驗前準備

          1使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。

          2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫用蒸餾水等

          3濃縮洗液與醫用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液

          4濃縮樣品稀釋液與醫用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液

          5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)

           

          四、操 作 步 驟

          1.取出酶標板,設空白孔,依照次序對應分別加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫用蒸餾水替代

          2、分別標記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。

          3、將酶標板置于37溫育30分鐘;

          4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體;

          5、每個孔中加滿應用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。

          6、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。

          7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。

          8、將96孔板置于37溫育30分鐘。

          9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體。

          10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。

          11、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。

          12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。A液、B液采用不同的吸頭加樣)

          13、將酶標板置于37避光溫育反應15分鐘。

          14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。

          15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內進行測定。

          16、根據制備的標準曲線,計算樣本含量

           

          五、結 果 判 斷

          1. 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;

          2、檢測值范圍:0400pg/ml

          3、敏感度:1.0pg/ml

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