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          兔(rabbit)去甲腎上腺素(NOR) 試劑盒說明書

          2014-03-12 [1044]

          兔(rabbit)去甲腎上腺素(NOR)

          本試劑盒僅供研究使用      標(biāo)本:血清或者血漿

           

          • 試 劑 組 成

          精密度微孔板96孔

          Microtitration Strips

          1

          2~8℃干燥保存

          酶標(biāo)偶合液

          (Conjugate )  

          1瓶 12.0毫升

          2~8℃冷藏保存

          標(biāo)準(zhǔn)品

          (Standard)

          5瓶 各1.0毫升

          2~8℃冷藏保存

          呈色劑A

          (Substrate A)

          1瓶 6.0毫升

          2~8℃避光冷藏保存

          呈色劑B

          (Substrate B)

          1瓶 6.0毫升

          2~8℃避光冷藏保存

          終止液

          (Stopping Solution)

          1瓶 6.0毫升

          室溫保存

          20倍濃縮洗滌液

          (Rinsing Buffer x 20

          1瓶 60.0毫升

          2~8℃冷藏保存

          5倍濃縮樣品稀釋液

          (Diluent x 5

          1瓶 15.0ml

          2~8℃冷藏保存

          英文說明書,中文說明書

           

          各一份

          室溫保存

           

          二、ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

          1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。

          1. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
          2. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。
          3. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
          4. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
          5. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。
          6. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
          7. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。

           

          三、ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

          1使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。

          2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等

          3濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液

          4濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液

          5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)

           

          四、操 作 步 驟
          1.取出酶標(biāo)板,設(shè)空白孔,依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中(空白孔視為0號標(biāo)準(zhǔn)品,用醫(yī)用蒸餾水替代

          2、分別標(biāo)記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。

          3、將酶標(biāo)板置于37溫育30分鐘;

          4、將酶標(biāo)板板取出,將其中的液體甩去,每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體;
          5、每個(gè)孔中加滿應(yīng)用洗滌液后,輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
          6、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
          7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。
          8、將96孔板置于37溫育30分鐘。
          9、將酶標(biāo)板取出,將其中的液體甩去,每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體。
          10、每個(gè)孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后,室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

          11、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
          12、在每個(gè)孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。A液、B液采用不同的吸頭加樣)

          13、將酶標(biāo)板置于37避光溫育反應(yīng)15分鐘。

          14、每個(gè)微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。

          15、在酶標(biāo)儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內(nèi)進(jìn)行測定。

          16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣本含量

           

          五、結(jié) 果 判 斷

          1. 儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;

          2、檢測值范圍:0800pg/ml

          3、敏感度:5.0pg/ml

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