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          豬丙二醛(MDA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

          2014-04-03 [1801]

          豬丙二醛(MDA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
          本試劑盒僅供研究使用。
          檢測范圍:                                                          96T
          0.3 nmol/L -8 nmol/L
          使用目的:
          本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中丙二醛(MDA)含量。
          實(shí)驗(yàn)原理
          本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬丙二醛(MDA)水平。用純化的豬丙二醛(MDA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入丙二醛(MDA),再與HRP標(biāo)記的丙二醛(MDA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的丙二醛(MDA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬丙二醛(MDA)濃度。 
          豬丙二醛(MDA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書試劑盒組成 
          1    30倍濃縮洗滌液    20ml×1瓶    7    終止液    6ml×1瓶

          2    酶標(biāo)試劑    6ml×1瓶    8    標(biāo)準(zhǔn)品(16 nmol/L)    0.5ml×1瓶
          3    酶標(biāo)包被板    12孔×8條    9    標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液    1.5ml×1瓶
          4    樣品稀釋液    6ml×1瓶    10    說明書    1份
          5    顯色劑A液    6ml×1瓶    11    封板膜    2張  
          6    顯色劑B液    6ml×1/瓶    12    密封袋    1個(gè)
          標(biāo)本要求 
          1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
          2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          豬丙二醛(MDA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作步驟
          1.    標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

          8 nmol/L    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          4 nmol/L    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          2 nmol/L    3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          1 nmol/L    2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          0.5 nmol/L    1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          2.    加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
          3.    溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
          4.    配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

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