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          ELISA試劑盒生物標儀原理介紹

          2015-01-15 [1165]

          酶標儀實際上就是一臺變相的光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同. 圖示是一種單通道自動進樣的酶標儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,ELISA試劑盒光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算,zui后由顯示器和打印機顯示結(jié)果. 微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現(xiàn)自動進樣檢測過程.而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單.
          微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液.
          光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。ELISA試劑盒人們只所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。酶標儀檢測單位
          光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
          但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性。在參照波長下,檢測物光的吸收zui小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。檢測值計算
          標儀進行檢測時,儀器其實要進行35個點的測量,選取zui中間的5個點的均值為本孔的OD值。
          參照通道是用來校準由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。用途和其它提示
          用于ELISA試劑的測定,廣泛用于各種實驗室,包括臨床實驗室。質(zhì)量控制
          質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質(zhì)量控制。空白校正
          有一些試劑盒的說陰書將空白孔設(shè)置為空氣,其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的,請按照試劑盒的說明書要求進行。檢測結(jié)果的解釋
          由于有相當多的因素會影響檢測的結(jié)果,如不同的酶標板,檢測試劑的體積,都會造成OD值的不同,因此,只有使用同一酶標板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的ELISA試劑盒說明書進行
          酶標儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得,也可用分光光度計相同的單色器來得到.在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣,濾光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,聚光鏡,光欄后到達反射鏡,經(jīng)反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經(jīng)濾光片送到光電管.
          從酶標儀工作框圖和光路圖上可看出,它和普通的光電比色計有以下幾點差異:
          在單通道酶標儀的基礎(chǔ)上又發(fā)展了多通道酶標儀,此類酶標儀一般都是自動化型的.它沒有多個光束和多個光電檢測器,如 12個通道的儀器設(shè)有 12條光束或 12個光源,12個檢測器和12個放大器,在X方向的機械驅(qū)動裝置的作用下,樣品12個為一排被檢測.多通道酶標儀的檢測速度快,但其結(jié)構(gòu)較復(fù)雜價

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