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          豬補(bǔ)體成分C7(C7)ELISA試劑盒使用方法

          2015-02-06 [1546]

          豬補(bǔ)體成分C7(C7)ELISA試劑盒檢測(cè)程序:

          在使用前,將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測(cè)定前。據(jù)建議,所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來測(cè)定一式兩份。

          1。準(zhǔn)備好所有試劑,工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。

          2。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥劑,密封保鮮袋,將未使用的井在4°C的含量布局表

          。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時(shí),在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測(cè)。

          4。每孔中取出的液體,不洗。

          5。向每孔中加入100μl生物素抗體(1倍)。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。孵育1小時(shí),在37℃下(生物素抗體(1X)可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫,輕輕混勻,直到出現(xiàn)均勻解決方案。)

          6。吸液的各孔和洗滌,共洗滌三次重復(fù)該過程兩次。洗凈,每孔填充洗滌緩沖液(200μL)使用噴瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,靜置2分鐘,*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后,清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾。

          7。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí),在37℃下

          8。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中,在步驟6的5倍。

          9。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘,在37℃下避光

          10。一站式解決方案,每孔加入底物,輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板,以確保充分混合。

          11。在5分鐘內(nèi),設(shè)置至450nm,使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度。如果波長(zhǎng)校正,設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長(zhǎng)在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,可能會(huì)比較高,不太準(zhǔn)確。

          豬補(bǔ)體成分C7(C7)ELISA試劑盒計(jì)算結(jié)果:

          建議使用專業(yè)的軟“曲線專家1.3"的標(biāo)準(zhǔn)曲線,這可以從我們的下載。

          平均每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)和樣品的重復(fù)讀數(shù)和平均減去零標(biāo)準(zhǔn)的光學(xué)密度。

          標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過減少使用能產(chǎn)生四參數(shù)邏輯(4-PL)的曲線擬合的計(jì)算機(jī)軟件的數(shù)據(jù)。作為一種替代方法,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)在y-軸的濃度通過繪制在x-軸為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度,并繪制一個(gè)通過在曲線圖上的點(diǎn)的*擬合曲線。該數(shù)據(jù)可以通過繪制的C7日志日志濃度與OD值,和可以通過回歸分析確定的*擬合線線性化。此過程會(huì)產(chǎn)生足夠的,但不太的適合的數(shù)據(jù)。

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