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          ELISA試劑盒的使用說明書

          2015-08-24 [2199]

               以前檢測一種抗體用整整一下戰書還算得暈暈的,現在給我十個八個的從包被到顯色,一個工作日基本搞定。可是在新老手操縱過程中老是會泛起或大或小的題目,本人在剛開始做ELISA試劑盒時就面對良多災題,固然有師兄師姐鋪路,但仍是經常做得烏煙瘴氣,好比說花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空缺還低。
               常用封鎖劑有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉,比較價廉,可以高濃度使用(5%-10%);還有一些稀有用到的各種動物血清(主要為了排除相似蛋白干擾)和酪蛋白等等。詳細的試驗還要有堅固的理論外也要實踐,看一下*可不可以應用到自己試驗當中去。ELISA試劑盒但*選用什么,要依據試驗詳細來實踐。應留意以下原理:因為蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用,這種物理吸附長短特異性的,受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響,大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯后才能固定在固相載體上。         

               可用作ELISA試劑盒測定的標本十分廣泛,體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份,ELISA試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保留。 ELISA試劑盒測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。

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