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          ELISA試劑盒的常用結果判定的方法

          2016-04-07 [1608]

          1.定性測定
           (1)ELISA試劑盒陽性判定值法(cut-offvalue,CO值):一般為陰性對照的平均A值加一個常數,試劑制備嚴格標準化,要先計算出陽性對照A值平均數和陰性對照A值平均數。標本A值≥CO值即為陽性。
          (2)抑制率法:在競爭抑制法中結果可用抑制率表示。
          抑制率(%)=(A陰性對照A-A待測)/陰性對照X100%,一般以抑制率≥50%為陽性試劑盒
          2.半定量測定 結果一般以滴度表示。將標本連續稀釋后,進行ELISA檢測,在陽性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標本的“滴度”。
          3.定量測定 即用己知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA試劑盒測定,與待測標本同時進行測定,繪制標準曲線,結果以量或活性單位表示之。
          1 材料與方法
          1.1 對象
          115位患者,年齡在32~73歲之間平均(50.8±7.1)歲。都是臨床初步診斷疑為腎病、糖尿病、風濕病及心血管病等等不同類型的患者。
          1.2 標本采集及處理
          取每位患者的晨尿4~5ml于冰箱4~8℃保存,收集至115份標本之后,1周之內同時采用2種方法測定。
          1.3 試劑與儀器
          美國DPC公司生產的IMMULITE型全自動化學發光分析儀;ELX—800酶標儀(美國BIO-TEK);洗板機(BIO-RAD,MODEL1575)。
          化學發光法試劑為:美國DPC公司生產的YZB/USA 2153-40 白蛋白試劑盒; ELISA法 :尿微量白蛋白ELISA試劑盒。
          1.4 方法
          1.4.1 化學發光法:嚴格按照美國DPC公司生產的 白蛋白試劑盒 操作手冊進行。
          1.4.2 ELISA 法:嚴格按照尿微量白蛋白ELISA試劑盒的操作手冊進行。
          1.4.3 測定分析:用上述兩種方法對上述115份患者尿標本微量白蛋白濃度進行測量,分別在ELX—800酶標儀上和全自動化學發光分析儀上直接讀取結果。
          1.5 統計學檢驗:采用SPSS10.0統計軟件,檢測數據表示用x±s,組間數據比較用t檢驗,變量間的變化采用相關性分析。

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