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          其受體及細胞因子的生物學測定法

          2016-06-08 [3023]

          很多細胞因子針對轉化的細胞及病毒感染的細胞具有溶細胞或抑制細胞生長的活性。常用的檢測細胞增殖的方法有3H-TdR摻人法、比色法、染色法和直接計數法等。檢測細胞因子促生長活性或抑制生長活性是將不同稀釋度的待測樣品或細胞因子標準品與培養的細胞株共同培養一定時間,然后檢測增殖的細胞數。此外,測定代謝產物熒光強度的方法也可檢測增殖細胞數,如ATP法和cAMP法。檢測細胞因子溶細胞八田胞毒活性或抑制生長活性是將不同稀釋度的待測樣品或細胞因子標準品與培養的細胞株共同培養一定時間,然后檢測存活的靶細胞數,酶聯免疫試劑盒并與對照比較求得溶細胞或抑制細胞生長的百分率,或以OD值對樣品稀釋度作圖,繪制標準品的劑量反應曲線,從曲線上求得相應的待測樣品的含量。生物學活性檢測法所用的靶細胞可直接從組織中分離,如骨髓細胞的集落形成試驗和胸腺細胞(脾細胞)的增殖試驗,或用體外培養的依賴細胞因子才能生長的細胞因子依賴株及對細胞因子殺傷敏感的細胞作為靶細胞。細胞因子還能誘導靶細胞表達某些表面分子或分泌一些蛋白質,可以用熒光素標記抗體檢測表達相應分子的細胞數,或用特定方法測定細胞分泌的蛋白質,間接了解細胞因子的活性。
          為了模仿擁擠的細胞內環境,酶聯免疫試劑盒研究人員用了多種不同數量的聚合物,以檢測它們在不同密度水平下的效果。結果發現,密集的環境使基因轉錄變得對環境缺乏敏感。當他們改變鎂、銨和亞精胺(一種能調節大分子穩定性和結合能力的化學物質)的密度時,低密度環境下基因表達的擾動變化比在高密度環境下更大。
              論文中指出,該研究證明大分子聚集會把生物線路和人造細胞納米系統中的細胞成分結合在一起,從而增加了基因表達的穩定性。酶聯免疫試劑盒研究人員認為,這些發現有助于理解細胞是如何適應分子聚集現象的,哪些是進化過程中保留下來的,而這些理解可能指導合成生物學家將來開發出人造細胞,用于藥物遞送、生物燃料生產和生物傳感器等。

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