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          原裝ELISA試劑盒的原理與適用

          2013-09-13 [893]

                  ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大。
          原裝ELISA試劑盒主要應用在以下方面:
          1)顯現微量的免疫沉淀反應。
          2)免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
          3)定量檢測體液中抗原或抗體成份。
          4)研究抗酶抗體的合成。
          原裝ELISA試劑盒的基本原理
          1)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;
          2)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;
          3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
          原裝ELISA試劑盒可能存在的弊端
          ELISA是目前應用zui廣泛的免疫標記檢測方法。但由于ELISA自身存在的缺陷和某些人為因素都可造成實驗性誤(漏)診的發生,分析引起實驗誤差因素。
          除人為因素外,影響原裝ELISA試劑盒的弊端如下:
          1)試劑的運輸與貯存ELISA試劑盒熱穩定性差,遇熱后靈敏度、特異性都將降低。在37℃下放置1d相當于4℃~10℃保存1.6個月,而ELISA試劑盒的貨架壽命只有6個月,這樣就要求試劑盒的在4℃~10℃下運輸貯存,各實驗室老師在試劑盒貯存環節上都能達到要求,但目前尚無法保證試劑盒的冷鏈運輸,在炎熱的夏季,試劑盒經過幾天的高溫,長途運輸,其貨架壽命也將消耗殆進,如各實驗室還按試劑說明書的有效期使用至6個月,將無法保證檢測結果的準確性。
          2)試劑盒質量試劑盒質量是關系到ELISA檢測結果準確度的核心問題,目前ELISA試劑盒的廠家和品牌眾多,產品質量也參差不齊。 

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