人ELISA試劑盒ELISA法特異性強(qiáng) ,敏感性高 ,操作快速簡(jiǎn)便 ,因而是免疫學(xué)檢驗(yàn)中zui為常用的方法 ,也是我們基層醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫學(xué)檢驗(yàn)的主要技術(shù)手段。我科乙肝五項(xiàng)、丙肝抗體、HIV抗體、梅毒抗體等均用ELISA法檢測(cè)。其中HBsAg的檢測(cè)量zui大。我們?cè)趯?shí)際工作中體會(huì)到ELISA法檢測(cè)的全程質(zhì)量控制很重要 ,的試劑、良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。現(xiàn)將我們平時(shí)在操作中認(rèn)為需要重視的步驟及遇到的一些問題報(bào)告如下 :
人ELISA試劑盒標(biāo)本的采集和保存
一般在醫(yī)學(xué)免疫檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集 ,應(yīng)注意避免溶血 ,因紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì) ,以HRP為標(biāo)記的 ELISA測(cè)定中 ,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染 ,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。標(biāo)本儲(chǔ)存時(shí)間過長(zhǎng),IgG可聚合成多聚體 ,在間接ELISA測(cè)定中導(dǎo)致本底過深 ,甚至造成假陽(yáng)性。一般說來,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過1周測(cè)定的需低溫冰存。
人ELISA試劑盒試劑的準(zhǔn)備
按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水 ,包括用于洗滌的 ,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。